中医古籍
  • 《实用免疫细胞与核酸》 (四)鞣酸—柠檬酸三钠还原法(Slot与Gueeze1985年)

    该法是以1982年Muhlpfordt法为基础,1985年Slot与Geuze对该法进行了改良,特点是通过改变鞣酸的用量制备出多种颗粒直径的胶体金,而且颗粒的直径均匀一致,很适合于双标及多标研究。制备3nm、5nm、10nm、15nm的胶体金颗粒见表5-3。

    表5-3 鞣酸—柠檬酸三钠还原法

    A 液B 液直径(nm)1%柠檬酸钠(ml)0.1mol/L K2CO3ml1%鞣酸(ml)H2O(ml)1%HAuCl4(ml)H2O(ml)3.340.2411.8179540.20.715.11791040.0250.115.8751791540.00250.0115.987179

    操作步骤:

    (1)根据所需要的胶体金颗粒分别配制A液和B液。

    (2)将配制好的A、B两液在水浴内加热到60℃,并通过控温装置使温度保持稳定。

    (3)在电磁搅拌器上搅拌A液迅速加入B液,继续加热直至胶体金变成葡萄酒色,时间大约7~10min。在A、B两液混合后可见溶液立即变成蓝色,大约1~3min就变成红色。

    用鞣酸—柠檬酸三钠还原法,柠檬酸三钠主要为还原剂,而鞣酸则有双重作用,一是还原作用,二是保护作用,控制“晶核”的形成过程,也就是说鞣酸的用量多少决定胶体金颗粒的大小形成,因此改变鞣酸的用量就可以改变胶体金的颗粒大小,达到制备不同直径颗粒的胶体金之目的。

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