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《实用免疫细胞与核酸》 一、应用同位素标记cRNA探针电镜原位杂交技术于染色体制片（Hutchison et al,1982）
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- 叶霖
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各省、自治区、直辖市卫生厅局、中医药管理局,新疆生产建设兵团卫生局：
全国中医药特色社区卫生服务示范区创建活动自2003年开展以来，各地积极开展社区中医药服务工作，取得了明显的成效，积累了许多有益的经验。为指导各级卫生、中医药行政管理部门、社区卫生服务机构进一步深入开展社区中医药服务工作，我局对各示范区社区中医药服务工作规律性经验和规范性做法进行提炼、整理，起草制定了《社区中医药服务工作指南（试行）》。现印发给你们，请结合各自实际情况，在工作中参考使用。在试行过程中有何意见和建议，请及时反馈国家中医药管理局医政司。
联 系 人：严华国 吴 迪
联系电话：010-65914966 65930672（传真）
二○○九年八月五日
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- 作者:
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（约着成于东汉时代以前）。
三卷。原言已佚，散见《经史证类备急本草》中，今有清．孙星衍等辑本若干种。 本书收药物 365 种，分为上、中、下三品，是后汉以前药物学的总结。
学术价值：
文献价值：我国现存最早之药学著作。
理论价值：初步奠定了药学理论之基础。
实用价值：记载之药物，大多朴实有验，历用不衰。
- 作者:
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- 作者:
- 徐大椿
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- 陈修园
（1）将整封染色体铺片放置于金网上，在70%的酒精蒸汽固定4～15h，空气干燥。
（2）以强碱使DNA变性，将金网置于2×SSC内（应用0.1n NaOH调整至pH12），室温，2min。
（3）脱水，以70%和95%酒精各冲洗3次，空气干燥。
（4）杂交，金网覆于平面玻璃皿（ Petri dish）内的杂交液滴上，每滴约10～15μl，将此小碟置于盛于杂交缓冲的大塑料盒内，保持湿润，在60～65℃孵育4～24h。
杂交液的配制：6×SSC或6×TNS（1×TNs =0.1mol/L NaCl,0.01mol/L Tris,Ph6.8,含30000～50000cpm/10μl3h cRNA）。
（5）杂交后冲洗，金网自杂交液中取出后立即用大量的2×SSC冲洗多次。RNA酶溶液（20μg/ml）室温冲洗，然后再用2×SSC室温冲洗，冲洗后梯度酒精脱水（70%，95%）空气干燥。
（6）浸入乳胶膜，应用L-4核乳胶液，水稀释4倍。浸膜后的金网，用胶带固定在载玻片上放在密封的黑色塑料盒内，4℃，时间根据同位素种类和靶mRNA含量而定，也可选择不同时间曝光，根据显影强弱确定最终显影的时间。
（7）显影。暗盒自冷房或冰箱中取出后，在室渐中回暖至少30min，以防核乳胶膜皱缩。然后在显影液（Kodax Microdol X）显影3～5min，温度18～24℃。水冲，在15% Kodax快速定影液定影5min，然后在空气中干燥。
所有溶液应尽可能新鲜配制。
（8）电镜观察。